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運用房水蛋白質體學於白內障及黃斑病變之眼睛疾病探討

為了解決rna splicing中文的問題，作者章瑋真 這樣論述：

白內障與原發性黃斑皺褶是很常見導致視力受損的共病疾病，在臨床上很常遇見病患白內障術後視力仍未改善的原因是因為有黃斑皺褶的影響，探討此二種疾病的房水蛋白質組成，有助於了解分別的病理致病機轉，藉此可能可以提供臨床上白內障疾病及原發性黃斑皺褶的預測及追蹤治療。原發性黃斑皺褶是位於黃斑部玻璃體與視網膜交界處的病理性纖維細胞病變，目前其可能的致病機制仍不清楚，藉由眼內房水蛋白質組成的變化，可能可以瞭解原發性黃斑部皺褶相關的分子變化；而白內障則是另一種常見的可致失明的眼部疾病，在蛋白質組成中發現可能導致白內障的疾病關鍵因子，將有助於更進一步了解白內障形成過程中的分子機轉。我們的目標是希望透過分析房水中蛋

白質體分析去發現原發性黃斑皺褶的病理生理機轉，並從不同白內障風險因子暴露的組別中，蛋白質體的分析去找尋導致白內障的潛在的分子機轉。首先，為了研究原發性黃斑皺褶和對照組的眼房水蛋白質組成，我們收集了來自10名原發性黃斑皺褶患者和 10名年齡匹配的對照組的樣本。然後，為了比較具有不同白內障致病危險因子（如糖尿病和吸煙）的白內障患者和無風險暴露的白內障對照組患者的房水蛋白表現有無差異，我們使用了無標記超高效液相色譜串聯質譜分析法，共收案了有8名糖尿病和吸煙患者（具有雙重風險因素）、5名糖尿病患者和 5 名吸煙患者（均具有單一風險因素）和10名年齡匹配的白內障對照患者（非風險暴露）入組。在原發性黃斑皺

褶和對照組之間，有 8 種蛋白質有差異表達。其中六種蛋白質被發現增加表現，兩種減少表現。基因本體論(Gene Ontology)分析表現出原發性黃斑皺褶與免疫功能有相互作用、與細胞增生和細胞外基質重塑等多個生物學過程密切相關。此外，多種蛋白質，包括Lumican蛋白、細胞週期蛋白依賴性激酶 13(cyclin-dependent kinase 13) 和膠原蛋白 alpha-3(VI)鍊(collagen alpha-3(VI) chain)皆與中央視網膜厚度相關，表示這些蛋白可能參與原發性黃斑皺褶的致病過程。眼房水中的Lumican表現亮在二組間有顯著差異也藉由酶聯免疫吸附試驗 (ELISA

) 得到證實。在探討白內障風險因子影響的研究中，共找到了136種房水蛋白，其中只有alpha-2-HS- glycoprotein被認為與不同風險暴露下的三組有顯著相關，因為它在這三組中存在差異表達，並且隨著風險的增加而表現量增加，我們也使用了ELISA確認糖尿病和對照樣品之間以及吸煙和對照組之間的房水alpha-2-HS- glycoprotein蛋白有顯著的變化。Lumican可能可以成為預測原發性黃斑皺褶產生和監測其進展的潛在房水生物標記物，而Alpha-2-HS- glycoprotein，亦稱為fetuin-a，可能是與糖尿病和吸煙這些白內障的致病風險因子相關的房水生物標記物。蛋白質

組學是研究人類房水組成很有用的工具，它為原發性黃斑皺褶和白內障疾病提供了許多有意義的線索可供進一步研究及探討。

干擾阿拉伯芥N-acetylglucosamine-1-P uridylyltransferase之基因表達， 降低蛋白質N-醣基化且誘發離層酸調控種子發芽及幼苗發育 對鹽逆境之敏感性

為了解決rna splicing中文的問題，作者陳雅惠 這樣論述：

鹽害是危害農業的主因之一。植物為了應付鹽逆境而演化調整代謝產物的配置或是改變植物賀爾蒙的生合成與訊號傳遞等策略。己醣胺生合成路徑 (HBP) 整合了葡萄糖、胺基酸、乙醯輔酶A、以及三磷酸尿核苷，以合成二磷酸尿核苷乙醯葡萄糖胺 (UDP-GlcNAc) 並提供GlcNAc醣分子作為蛋白質醣基化之原料。阿拉伯芥有兩個乙醯葡萄糖胺-1-磷酸尿甘醯轉移酵素 (GlcNAc1pUTs)，是GlcNA.UTs基因轉譯的產物，能催化HBP的最後一個步驟，但它們的生化及分子功能仍有待發掘。本研究中，我們在glcna.ut2剔除突變株中採用dsRNAi技術來降低GlcNA.UT1的基因表達，並稱此轉基因植物為

iU1。iU1在鹽逆境下的種子萌發和早期幼苗發育受到抑制，UDP-GlcNAc的生合成減少、蛋白質N-醣基化改變、且出現未折疊的蛋白質反應 (unfolded protein response)。由於延遲種子萌發和早期幼苗發育受阻皆可以通過外源性fluridone（一種離層酸生合成抑製劑）以及藉由導入離層酸生合成突變基因 aba2或nced3來挽救，因此iU1轉基因植物的鹽敏感性狀與離層酸生合成有關。轉錄組學分析進一步支持了離層酸生合成和信號傳遞對iU1鹽敏感性狀的重要性。總結來說，GlcNAc1pUT對UDP-GlcNAc生合成、蛋白質N-醣基化、以及離層酸調控的種子發芽和幼苗發育過程中對鹽

逆境的敏感性的調控至關重要。我們的實驗結果為連結HBP、蛋白質醣基化、植物荷爾蒙，與鹽逆境之間的關係提供了相關證據。