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不同精子活力之公鵝精液蛋白質差異表現之研究

為了解決Ejaculatory duct的問題，作者簡安娸 這樣論述：

精液品質影響公鵝受精率與繁殖力，精子活力為精液性狀的主要特性之一，其對受精作用具有重要影響，精漿可提供精子安全環境以利於進入雌性生殖道中，也提供精子所需部分營養，並具有緩衝溶液特性，可吸收精子代謝之產物及影響精子結構與功能，而荷爾蒙機制也會調控繁殖能力。本研究之目的為探討公鵝血清中性腺荷爾蒙是否與精子活力有相關性，以及不同精子活力之公鵝精子與精漿蛋白質差異表現。試驗共使用39隻(平均月齡=24±2)白羅曼公鵝，採集其血液與精液樣品，血液用於分析不同活力群之睪固酮和雌二醇濃度，精液進行精液品質評估，取精子活力前後15%公鵝精液之精子與精漿，以isobaric tags for relative

and absolute quantification (iTRAQ)進行蛋白質分析。血清中睪固酮、雌二醇濃度以及睪固酮與雌二醇比值於兩族群之間皆無顯著差異。精子蛋白質分析結果顯示，在3,090個定量蛋白質中有93個蛋白質在組間表現量具顯著差異，且其表現量差異達1.5倍以上，此等差異表現蛋白質中，56個在高活力組表現量較高，37個表現量較低；基因功能分析結果顯示此等差異表現蛋白質主要參與細胞過程(27%)、生物過程調控(24%)、細胞成分組織或生物合成(11%)和代謝過程(11%)等生物過程，主要位於細胞質(44%)和胞外囊泡(10%)，並與蛋白質結合(33%)、水解酶活性(16%)和離子結

合(12%)等分子功能有關。精子蛋白質功能分析結果顯示，與能量代謝有關之L-lactate dehydrogenase、NADH dehydrogenase和adenylate kinase 8及與精子結構有關之outer dense fiber 2、tektin 2和sperm-associated antigen 6在高活力精液之精子表現量較高。精漿蛋白質分析結果顯示，在675個定量蛋白質中有27個蛋白質表現量具顯著的組間差異，其中14個於高活力精液之精漿中表現量較高，13個表現量較低。此等差異蛋白質主要參與生物過程調控(30%)和刺激反應(26%)等生物過程，主要位於細胞質(34%)且與

蛋白質結合(63%)和水解酶活性(19%)有關，功能分析結果顯示，與氧化傷害有關之glutathione S-transferase Mu 1及與抗蛋白酶有關之alpha-1-antiproteinase 2在高活力精液精漿之表現量較高。綜合本研究結果可知，公鵝血清中性腺荷爾蒙與精子活力可能無一定關聯性，而高精子活力精液精子與精漿蛋白質中，與能量代謝、精子結構、抗氧化和抗蛋白酶相關之蛋白質表現量較高，因而有利於精子活力。

探討在先天性雙側輸精管缺損中受CFTR調控之SLC9A3蛋白的角色

為了解決Ejaculatory duct的問題，作者林勇志 這樣論述：

先天性雙側輸精管缺損(CBAVD)在不孕症男性病患中佔1~2%，是由纖維囊腫基因(CFTR)突變所導致的囊性纖維化(CF)中較輕微的症狀。文獻指出在36位台灣CBAVD不孕症男性病患中，有17位病患未檢出CFTR基因突變。實驗室先前研究透過oligonucleotide array based CGH和Real-time PCR for genome-wide search of copy number variants (CNVs)，發現鈉氫離子交換蛋白基因(SLC9A3)可能是CBAVD相關基因。SLC9A3蛋白主要負責人體腸道和腎臟近曲小管中鈉離子及體液再吸收的功能。此外，相關文獻提到

SLC9A3蛋白在細胞及小鼠胰管組織中與CFTR蛋白有交互作用。另外在Slc9a3基因剔除小鼠中發現睪丸網及輸出小管有膨脹以及公鼠不孕現象。因此，我們探討在台灣CBAVD患者中SLC9A3基因所扮演的角色。在RT-PCR結果指出Slc9a3基因表現在輸精管，以及藉由免疫螢光染色得到SLC9A3蛋白表現在小鼠輸精管腔上皮細胞頂端和底端細胞膜上。在人類SLC9A3基因定序結果也找到許多遺傳變異如c.676-44C>A，c.2031G>A，c.2068-43G>C 和c.2128A>C。另外，在Slc9a3基因剔除小鼠中，公鼠睪丸重量增加，而副睪，輸精管和儲精囊重量減少。進而在睪丸生精小管中也觀察到

生殖細胞層受到擠壓變薄，副睪頭部部份管腔中缺乏成熟精蟲，和副睪尾部及輸精管管腔中缺乏精蟲。上述的結果顯示SLC9A3基因遺傳變異可能和台灣先天性雙側輸精管缺損有關，以及Slc9a3基因剔除小鼠導致公鼠不孕。