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靈芝萃取物對人類皮膚纖維母細胞的增生與在化妝品的應用
為了解決collagen晚霜 的問題,作者阮郁婷 這樣論述:
本研究旨在探討利用不同溶劑 (包括甲醇、正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、水)所抽取的靈芝 (Ganoderma lucidum)萃取物在抗老化化妝品的開發應用。本研究分為兩個部份:第一部份以不同溶劑萃取靈芝並針對不同靈芝萃取物,比較各萃取物在抗氧化之能力,建立高效液相層析指紋圖譜並比對推測可能的化合物,並探討不同的靈芝萃取物對人類皮膚纖維母細胞增生及促進膠原蛋白產生之影響,第二部份為將上述實驗結果中最佳的靈芝萃取物添加入乳霜基本配方中,並測量產品的安定性、人體的安全性與有效性如保水性、彈性、紅黑斑、粗糙度之評估。分別以甲醇 (GaluM)與熱水 (GaluH2O)萃取之萃取率各佔3.01%及2.7
2%,甲醇萃取物用不同溶劑如:正己烷、乙酸乙酯、正丁醇、水分離萃取所得到之分離物如:甲醇萃取物/正己烷分離物 (GaluMPh) 甲醇萃取物/乙酸乙酯分離物 (GaluMPe)、甲醇萃取物/正丁醇分離物(GaluMPb)、甲醇萃取物/水分離物 (GaluMPw),其中以乙酸乙酯的分離物的萃取率最高,萃出率為0.99%,靈芝萃取物以薄層色層 (TLC)、高效液相層析儀 (HPLC)和紅外光譜儀 (IR)分別用來檢測各萃取物的組成份,官能基。由液相質譜儀 (LC-MS)之結果推測靈芝萃取物中可能有三萜類結構。在比較清除 DPPH自由基之能力,以 GaluM 清除能力為 81.09%,Trolox
抗氧化當量中以 GaluMPb的 TEAC含量為 3.06 mM 為最佳,兩者體外實驗 (DPPH與Torolox) 結果均隨濃度提高而增高。對人類皮膚纖維母細胞 CCD-966SK 增生,不同濃度不同溶劑抽取之靈芝萃取物,在培養 24小時無增生情形,在培養 48小時後以 GaluMPw 濃度 200 μg/ml比控制組的細胞增生率為 139.84% 最為顯著,培養 72小時後以 GaluMPe 濃度 0.2 μg/ml 比控制組的細胞增生率為125.97%,高於其它組樣品,實驗結果顯示隨濃度增高對 CCD-966SK增生有抑制的效果,尤其在濃度為 2000 μg/ml時,所有靈芝萃取物皆有抑
制增生情形。在促進膠原蛋白合成實驗之結果顯示,靈芝萃取物與 CCD-966SK培養 24、48小時後,GaluMPe在 2 μg/ml時生成量最為顯著。將GaluMPe配製成含不同濃度0.002%, 0.020%, 0.200%靈芝萃取物之乳霜,在其安定性上經超音波震盪 (135 W, 42 kHz ) 5 min及離心 (3000 rpm) 30 min後不會發生相分離情形,可放置 4個月以上,pH值的變化並不顯著,可知該產品具有良好的安定性。含有 0.002%, 0.020%, 0.200%靈芝甲醇萃取物/乙酸乙酯分離物乳霜與不含靈芝萃取物之基礎配方進行人體測試,在 6星期內塗抹含 0.0
20% GaluMPe在對抗皮膚老化的皺紋度有減少皺紋增加情形,最高濃度 0.200%在塗抹 6星期後能增進皮膚保水性; 所有乳霜在皮膚酸鹼值中皆維持在正常皮膚弱酸性範圍。
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