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製備具抗氧化抗凝血幹細胞標靶之多功能奈米粒子於再灌流損傷的應用

為了解決VVK的問題，作者詹博盛 這樣論述：

心肌梗塞 (myocardial infarction, MI) 後再灌流手術 (Ischemia reperfusion,IR)，會造成心肌再受傷。本實驗製備包覆 Cyclosporine A (CsA) 的 PLGA-FITC(P) /Stearylamine (S) 奈米粒子 (P NP) ，並以 Layer-by-Layer 技術將肝素(Heparin, hp ) (先以紅色螢光標記的 bovine serum albumin (B-RITC) 作為 hp 模型藥)、穀胱甘肽(glutathione, G)、玻尿酸 (Hyaluronic acid, HA) 依序修飾於粒子表面得到

P/hpGHA NPs，此粒子具備螢光、抗凝血、抗氧化、標靶幹細胞等功能，預期作為減少再灌流損傷的應用。材料定性方面，以 DLS 及 TEM 之 core-shell 大小分析奈米粒子修飾各種生物分子後的粒徑及表面電位，並使用 FT-IR spectra 進行粒子結構分析。定量方面利用高效液相層析儀 (High performance liquid chromatography, HPLC) 及螢光分析儀來計算 CsA 與 BSA-RITC 的載藥率分別為 1.8±0.03% 和 3.8±0.2%。體外釋放實驗顯示 CsA 和 BSA- RITC 於第 4 個小時 CsA 與 BSA-RITC

分別釋放 33.1±3.8% 與 49.4±3.3%，釋放到第 48 小時 CsA 與 BSA-RITC 分別釋放 45.76±2.5% 與 61.62±2.7%。修飾上 heparin、GSH、HA 的粒子 P/hpGHA NPs，粒子中 GSH 含量使用 DTNB 量測，每毫克奈米粒子的 GSH 載藥率為 0.75±0.059% (w/w)，此外也藉由 SF/HRP/H2O2 自由基系統藍色螢光的降低，證實修飾上 GSH 的奈米粒子具有還原自由基的能力。體外凝血實驗測試，加入 P/hpGHA NPs 之後凝血時間增長為 3 倍，證明 P/hpGHA NPs 具有抗凝血功能。從 BMSC

粒子 uptake 實驗可觀察到 P/hpGHA NPs uptake 的數量及速率都明顯比 P NPs 來的快，且從 pretreat HA 後的 uptake 實驗能夠確認，P/hpGHA NPs 大多數的 uptake 作用是藉由外部修飾的 HA 受體所介導的。此具有螢光、搭載 CsA 、抗氧化、抗凝血且標靶 MSC 的多功能奈米粒子是具有治療心肌梗塞後再灌流傷害的潛力。