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而第二篇論文明新科技大學 化學工程與材料科技系碩士班 龍明有所指導 葉致均的 固態醱酵生產桑黃菌絲體之最適化微波萃取三萜類和多醣體及其抗氧化特性研究 (2015),提出因為有 桑黃、多醣體、三萜類化合物、反應曲面法、最適化萃取、微波萃取、抗氧化的重點而找出了 Sigma F10的解答。

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家禽里奧病毒p17抑制癌細胞株之細胞週期及調控PTEN/FAK/Src路徑抑制癌細胞轉移

為了解決Sigma F10的問題,作者楊恩穎 這樣論述:

惡性腫瘤為國人十大死因中連續32年榜首,平均每天有119人死於癌症。本實驗室已證實家禽里奧病毒p17蛋白可抑制Vero細胞之核孔蛋白 Tpr,活化p53、PTEN,並藉由促進Rak結合PTEN使其穩定,進而抑制PI3K/Akt/mTORC1路徑與細胞週期。然而p17是否可抑制癌症細胞株之細胞週期遷移尚待進一步確認,因此本研究擬探討p17蛋白是否抑制不同癌細胞之遷移及其機制。本研究證實p17抑制Hela、A549與B16-F10癌細胞之核孔蛋白Tpr使p53堆積於核內並活化PTEN及p21進而抑制細胞週期及細胞遷移。經由p17分別與p53、Tpr、PTEN、Rak及Rock shRNAs共轉染

,證實PTEN於p17 抑制細胞遷移中扮演重要角色。結果顯示缺少p53、PTEN、Rak及Rock顯著抑制p17作用,進一步證實p17藉由p53/PTEN路徑抑制癌細胞遷移。以流式細胞儀(flow cytometry)進行細胞週期分析,證實p17可抑制A549癌細胞細胞周期,經由Rak shRNA及ROCK shRNA共轉染進一步證實PTEN對於p17抑制A549細胞周期之重要性。為探討p17影響細胞遷移之機制,藉由西方墨點法分析相關訊號,結果顯示p17可抑制FAK Y397之磷酸化,且隨p17蛋白表現量增加FAK Y397之磷酸化有減少之趨勢。p17共轉染PTEN shRNA並以西方墨點法分

析下游訊號,結果證實p17蛋白顯著抑制下游Src及MMP9,以shRNA抑制PTEN,則p17無法有效抑制下游訊號。將p17共轉染PTEN或PTEN C124A並以免疫沉澱分析FAK與Src是否形成複合體,結果顯示p17藉由活化PTEN抑制FAK活化,並抑制FAK/Src形成複合體,進而抑制細胞遷移,若PTEN磷酸酶活性位受到突變,則p17無法抑制FAK活性。本研究證實p17可藉由活化p53/PTEN路徑抑制癌細胞株細胞週期及細胞遷移,並進一步確認p17蛋白藉由PTEN抑制FAK/Src形成複合體及MMP9抑制細胞遷移。

固態醱酵生產桑黃菌絲體之最適化微波萃取三萜類和多醣體及其抗氧化特性研究

為了解決Sigma F10的問題,作者葉致均 這樣論述:

桑黃(phellinus igniarius)屬於在多孔菌科的擔子菌門上的藥用真菌之一,桑黃的子實體及菌絲體有強化人體免疫系統的天然有效成分,研究顯示桑黃萃取物含多醣體、三萜類等具有多項生物活性功能包括:抗氧化、抗腫瘤、增加免疫能力、等功能,的固態基質之營養成分,提供桑黃菌絲體養分或生長所需的環境,以生產所需要之產物。本研究主要乃利用糙米為基質固態醱酵培養桑黃菌絲體。利用熱水萃取桑黃多醣體,再探討前處理時間、溶劑與重量比、微波時間、微波瓦數對萃取桑黃多醣體之影響,再利用回應曲面法優化萃取條件,找出最適萃取液進行抗氧化分析。利用乙醇萃取桑黃中所含三萜類化合物,探討前處理時間、乙醇濃度、溶劑與重

量比、微波時間、微波瓦數對萃取桑黃中所含三萜類之影響,再利用回應曲面法優化萃取條件,找出最適化萃取桑黃中所含三萜類的參數,求得最適化之萃取條件並進行抗氧化分析實驗。由實驗結果可得知,利用Box-Behnken實驗設計(BBD)萃取桑黃中所含多醣體條件的最適化,將獲得之實驗數據進行擬合,利用多元分析二階多項式方程式進行統計分析,多項式迴歸模型所得係數(R2=0.9328)與實驗結果有良好的一致性。最適化桑黃多醣體萃取條件為,熱水萃取時間2小時、溶劑與重量比39 ml/g、萃取溫度80 ℃,微波瓦數為500W、微波時間為156秒,得總多醣體含量為100.33 mg/g,進一步將最適化條件萃取液之桑

黃多醣體進行抗氧化特性分析。 結果顯示桑黃多醣體在10000 ppm抗氧化分析時,還原能力之吸收值為2.942、清除DPPH自由基之清除率為72.318 %、螯合亞鐵離子能力之螯合率為29.939 %、抗氧化能力硫氰酸鐵法之清除率為45.14 %,以及清除超氧陰離子自由基能力之清除率為29.01 %。利用Box-Behnken實驗設計(BBD)萃取三萜類化合物條件的最適化,可獲得之實驗數據進行擬合,利用多元分析二階多項式方程式進行統計分析,多項式迴歸模型所測定係數(R2=0.9643)與實驗結果有良好的一致性。最適化桑黃中所含三萜類化合物萃取條件為,前處理時間為24 hr、乙醇濃度88

%、微波瓦數為500 W、微波時間為155 s、溶劑與重量比74 ml/g,在此條件最適化條件下,可得桑黃三萜類含量為79.92 mg/g,進一將最適化條件萃取液進行抗氧化特性分析。 結果顯示由桑黃所萃取之三萜類在10000 ppm抗氧化分析時,還原能力之吸收值為2.854、清除DPPH自由基之清除率為74.186 %、螯合亞鐵離子能力之螯合率為44.929 %、抗氧化能力硫氰酸鐵法之清除率為61.752 %,以及清除超氧陰離子自由基能力之清除率為51.789 %。根據實驗結果,經由固態醱酵培養桑黃菌絲體之多醣體和三萜類化合物具有良好的抗氧化特性,並可以應用於具有保健性及機能性之桑黃產品

上。