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臺灣鋏蠓之化學感應蛋白特性及其高親和性配體之研究

為了解決誘捕 小黑蚊的問題，作者湯秋鳳 這樣論述：

臺灣鋏蠓 (Forcipomyia taiwana)，又名小黑蚊，屬於雙翅目 (Diptera)，蠓科 (Ceratopogonidae)，鋏蠓屬 (Forcipomyia)，蠛蠓亞屬 (Lasiohelea)，體長約 1.4 毫米，雌蟲嗜吸人血，被雌蟲叮咬後，體質敏感者皮膚會紅腫、奇癢難忍，為騷擾性的害蟲。在先前研究中發現台灣鋏蠓具化學感應蛋白 (Chemosensory protein，CSP)，經胺基酸序列比對後，發現與其他昆蟲之 CSP 具高度相似性。將台灣鋏蠓 csp 基因於大腸桿菌 (Escherichia coli) 中表現並純化後，經二級結構分析與結合試驗，證實屬於 CSP。

CSPs 是一群具可溶性之小分子蛋白質，普遍存在於昆蟲之感覺器。CSPs 的分子量約為12-13 kDa，其胺基酸序列中帶有四個 cysteines 形成兩個雙硫鍵 (disulfide bonds)，構造中含有六個 α-helices，中間形成疏水性通道，是疏水性氣味分子之結合位置。昆蟲藉由 CSPs 與環境中之疏水性氣味分子結合，觸動感覺器內之嗅覺神經樹突接受器，辨識外界環境，調整生理及行為反應。為了防制台灣鋏蠓的為害，本研究是利用台灣鋏蠓之 CSP 可能具有結合氣味分子及參與感覺器偵測之特性，篩選出高親和性配體，進行誘引相關之研究。以大腸桿菌表現台灣鋏蠓之 CSP，純化後篩選最適反應條件

，為 pH 7、30℃，於此反應條件下之配體結合試驗顯示，CSP 對山繭蛾 (Antheraea polyphemus) 的費洛蒙成分 (Z)-11-hexadecenal，及存在於水果成分之酯類化合物 Hexyl benzoate 及 Butyl benzoate 的親和性最佳。利用 Ｙ 型管測試具親和性之配體，皆對台灣鋏蠓具有 60% 之誘引效果，進一步以不同型式之誘捕器觀察，結果顯示盒式誘捕器，放置溶於增稠劑之 (Z)-11-hexadecenal，其以一個開口朝下對台灣鋏蠓的誘引效果較佳。